TMIE CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423149

개요

마우스 Tmie는 내이 유모세포의 기계적 신호전달(mechanotransduction) 기계에서 필수 구성요소로 기능하는 작은 막관통 단백질 TMIE를 암호화한다. TMIE는 섬모(stereocilia)에서 MET 채널 복합체의 조립과 안정화에 관여하며, 기계적 자극을 청각 신호를 유도하는 수용기 전위로 변환하는 과정을 뒷받침한다. TMIE가 교란되면 유모다발(hair-bundle) 기능이 손상되고, 이온 유속과 막 흥분성이 변화하며, 청각과 평형에 필요한 감각 신호전달 경로가 저해된다. TMIE/Tmie의 유전적 결함은 유전성 난청 표현형과 연관되어 있어, 마우스 모델에서 와우 발달, 유모세포 생리, 감각신경 회로 기능을 연구하는 데 관련성 높은 표적이다.

TMIE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tmie 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tmie 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tmie의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TMIE 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TMIE 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tmie 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TMIE 기능에 중요한 Tmie 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tmie 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TMIE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TMIE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tmie 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TMIE HDR 플라스미드 (m) 및 TMIE HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tmie 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tmie 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.