TMEM97 Lentiviral Activation Particles (h): sc-411997-LAC

TMEM97 kodiert das Transmembranprotein 97, eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Komponente des Sigma‑2‑Rezeptorkomplexes, der die zelluläre Cholesterinhomöostase und den Lipidtransport moduliert. TMEM97 wurde mit der Regulation der Aufnahme von Low‑Density‑Lipoproteinen (LDL) durch Interaktionen mit Lipoproteinrezeptoren sowie mit umfassenderen Prozessen der Membranorganisation in Verbindung gebracht, die Signalübertragung und metabolische Anpassung beeinflussen. Indem TMEM97 die Sterolverteilung und die Proteostase im sekretorischen Weg mitprägt, kann es Stressantwort-Netzwerke und die Funktion von Organellen beeinflussen. Veränderte TMEM97-Expression und mit dem Sigma‑2‑Rezeptor assoziierte Biologie wurden in Kontexten wie Neurodegeneration, metabolischer Dysregulation und krebsassoziierten Veränderungen von Zellzuständen untersucht, was seine Eignung als mechanistisches Ziel in Pathway-Studien unterstreicht.

TMEM97 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TMEM97-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TMEM97 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TMEM97-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TMEM97-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TMEM97-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.