TMEM38B Lentiviral Activation Particles (h): sc-412461-LAC

TMEM38B kodiert ein multipassiges Membranprotein des endoplasmatischen Retikulums, das einen Kationenkanal bildet und an der Regulation des intrazellulären Calciumhaushalts beteiligt ist. Durch die Modulation des Ca2+-Flusses und die Kopplung der ER-Calciumdynamik an Erregungs‑Kontraktions‑Kopplung sowie stressadaptive Signalwege kann TMEM38B Prozesse wie die Calciumhomöostase, die ER-Funktion und nachgeschaltete transkriptionelle Programme beeinflussen. Genetische Störungen von TMEM38B wurden mit skelettalen Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter Formen der Osteogenesis imperfecta, was seine Bedeutung für die Knochenbiologie und die Integrität des Bindegewebes unterstreicht. Diese Eigenschaften machen TMEM38B zu einem nützlichen Ziel für die Untersuchung calciumabhängiger Signalübertragung, ER-bezogener Signalwege und Genotyp‑Phänotyp‑Zusammenhänge in humanen Zellmodellen.

TMEM38B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TMEM38B-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TMEM38B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TMEM38B-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TMEM38B-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TMEM38B-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.