TM4SF19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406884

Visão geral

TM4SF19 (membro 19 da família transmembrana 4 L seis) codifica uma proteína de membrana do tipo tetraspanina, prevista para organizar microdomínios de membrana e modular interações célula–célula ou célula–matriz. Como membro da família TM4SF, a TM4SF19 está associada a processos como o agrupamento de receptores, a transdução de sinais na membrana plasmática e a regulação de vias relacionadas à adesão que influenciam a migração e a organização epitelial. Alterações na expressão de proteínas TM4SF foram relatadas em múltiplos contextos de câncer, o que sustenta a investigação da TM4SF19 na biologia tumoral, em fenótipos de invasão e na sinalização do microambiente. Estudos de perturbação de TM4SF19 também podem elucidar mecanismos de tráfego de proteínas de membrana e a composição do “surfaceome” em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TM4SF19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TM4SF19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TM4SF19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TM4SF19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TM4SF19.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TM4SF19 para a investigação da sinalização de TM4SF19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TM4SF19 críticos para a função TM4SF19
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TM4SF19 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TM4SF19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TM4SF19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TM4SF19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TM4SF19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TM4SF19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TM4SF19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TM4SF19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.