TLR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine): sc-437333
- alvos específicos: bovine
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TLR4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (bovine) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TLR4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TLR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) | sc-437333 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O receptor do tipo Toll 4 (TLR4) é um receptor de reconhecimento de padrões que detecta lipopolissacarídeo e outros ligantes associados a patógenos e a dano, iniciando a sinalização imune inata em células mieloides e epiteliais bovinas. A ligação do ligante aciona vias dependentes de MyD88 e TRIF, ativando programas transcricionais de NF-κB e IRF que regulam citocinas pró-inflamatórias, quimiocinas e respostas de interferon tipo I. A sinalização de TLR4 também se cruza com cascatas de MAPK e com a preparação (priming) do inflamassoma, moldando o recrutamento de leucócitos e o tônus inflamatório ao nível tecidual. A atividade desregulada de TLR4 tem sido associada a fenótipos de doenças inflamatórias e infecciosas em bovinos, incluindo mastite e respostas sistêmicas impulsionadas por endotoxinas, tornando-o relevante para o estudo de interações hospedeiro–patógeno e da homeostase imunológica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TLR4 (bovine) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares bovine. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TLR4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de TLR4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função TLR4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TLR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) e pelo TLR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TLR4 Plasmídeo HDR (bovine) e o Plasmídeo HDR TLR4 (bovine2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.