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TGIF慢病毒激活颗粒(h) | sc-401472-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 TGIF1 基因编码 TGIF,这是一种 TALE 同源盒转录共抑制因子,在发育与组织稳态过程中调控基因表达程序。TGIF 通过与 SMAD2/3 复合体结合并招募共抑制复合体,整合进入 TGF-β/SMAD 信号通路,从而精细调节转录反应,进而影响细胞命运决定、上皮–间质转化(EMT)以及分化过程。它还与视黄酸依赖的转录网络及更广泛的染色质调控过程发生交叉作用,共同塑造形态发生。TGIF1 活性或表达失调与先天性发育表型相关,并在肿瘤相关的转录重编程以及异常的 TGF-β 通路输出背景下受到研究。
TGIF 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TGIF1 表达。
TGIF 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TGIF1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TGIF表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TGIF1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。