TETRAN CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411436

概要

MFSD10 は TETRAN をコードしており、TETRAN は複数回膜貫通型の膜タンパク質で、主要ファシリテーター・スーパーファミリー（MFS）に属することと整合して、溶質輸送に関連する過程や膜恒常性の維持に関与すると考えられています。推定上のトランスポーター様因子として、TETRAN はエンド膜系トラフィッキング、オルガネラ機能、ならびに細胞の代謝適応の研究において注目されます。というのも、小分子フラックスの変化がストレスシグナル伝達や下流の転写プログラムを調節し得るためです。MFSD10 発現の変動は、複数の疾患コンテキストにわたるトランスクリプトーム・データセットで報告されており、代謝の破綻や細胞状態遷移への寄与を検討する根拠となっています。TETRAN の機能を明らかにすることは、膜輸送ネットワークがヒト細胞における増殖・生存・分化の表現型にどのように影響するかを理解する上で役立ちます。

TETRAN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMFSD10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MFSD10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MFSD10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TETRANタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TETRANシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MFSD10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TETRANの機能に不可欠なMFSD10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MFSD10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TETRAN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTETRAN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MFSD10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TETRAN HDRプラスミド（h）および TETRAN HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMFSD10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMFSD10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。