TEF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423328

Visão geral

Tead3 codifica o TEF-5, um fator de transcrição com domínio TEA/ATTS que atua em parceria com coativadores como YAP/TAZ para regular programas de expressão gênica dirigidos por enhancers que controlam a proliferação celular, a sobrevivência e a especificação de linhagem. Em camundongos, o TEF-5 contribui para o padrão de desenvolvimento e o crescimento de órgãos ao integrar sinais da via Hippo com respostas transcricionais dependentes do contexto. A atividade da família TEAD é amplamente associada à mecanotransdução e a estados de células-tronco/progenitoras, tornando o Tead3 um nó relevante para estudar o controle do crescimento e a homeostase tecidual. A desregulação do circuito transcricional TEAD–YAP/TAZ está associada a fenótipos tumorigênicos e regeneração aberrante em múltiplos sistemas-modelo, o que sustenta seu uso em pesquisas de vias e mecanismos de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TEF-5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tead3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tead3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tead3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TEF-5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tead3 para a investigação da sinalização de TEF-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tead3 críticos para a função TEF-5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tead3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TEF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TEF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tead3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TEF-5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TEF-5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tead3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tead3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.