TDRD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410043

Visão geral

TDRD1 (Tudor domain containing 1) é uma proteína de ligação a RNA enriquecida na linhagem germinativa que reconhece resíduos de arginina simetricamente dimetilados em proteínas da família PIWI e dá suporte à montagem da via de piRNA. Por meio dessas interações, a TDRD1 contribui para o silenciamento de transposons, a manutenção da integridade do genoma e a progressão adequada da espermatogênese, ao coordenar a biogênese de piRNAs e a organização de grânulos germinativos. A perturbação da vigilância de piRNAs dependente de TDRD1 está associada a defeitos no desenvolvimento das células germinativas masculinas e a fenótipos de fertilidade reduzida, refletindo seu papel central na proteção do genoma da linhagem germinativa. Alterações de expressão e programas germinativos desregulados envolvendo TDRD1 também têm sido investigados no contexto da biologia de antígenos câncer-testículo e da desregulação epigenética em tumores.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TDRD1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TDRD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TDRD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TDRD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TDRD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TDRD1 para a investigação da sinalização de TDRD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TDRD1 críticos para a função TDRD1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TDRD1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TDRD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TDRD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TDRD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TDRD1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TDRD1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TDRD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TDRD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.