TDO2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402482

개요

TDO2(트립토판 2,3-디오옥시게네이스)는 헴(heme) 의존성 효소로, 키뉴레닌 경로를 통한 트립토판 분해 과정에서 첫 단계이자 속도 제한 단계(rate-limiting step)를 촉매하여 L-트립토판을 N-포밀키뉴레닌으로 전환합니다. TDO2는 세포 내 트립토판의 이용 가능성과 하위 키뉴레닌 대사산물을 조절함으로써 세포 대사 항상성에 영향을 미치며, 아미노산 고갈에 반응하는 경로와 대사산물에 의해 구동되는 전사 프로그램을 통해 신호 전달을 조절할 수 있는데, 여기에는 아릴 하이드로카본 수용체(AHR) 활성도 포함됩니다. TDO2 발현은 간에서 가장 두드러지지만, 트립토판 대사의 변화가 산화환원 균형, NAD+ 전구체 플럭스, 면역-대사 간 상호작용에 영향을 미치는 간 외(extrahepatic) 환경에서도 연구되고 있습니다. TDO2가 관여하는 키뉴레닌 경로 활성의 이상 조절은 염증 및 암 관련 대사 재구성과 연관된 것으로 보고되어, 종양 미세환경과 면역대사에 대한 기전 연구에서 그 중요성이 뒷받침됩니다.

TDO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TDO2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TDO2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TDO2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TDO2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TDO2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TDO2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TDO2 기능에 중요한 TDO2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TDO2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TDO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TDO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TDO2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TDO2 HDR 플라스미드 (h) 및 TDO2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TDO2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TDO2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.