TCP-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423314

概要

Tcp11は、精子関連タンパク質TCP-11をコードしており、精巣で高発現する因子として、精子形成後期および精子の機能的成熟に関与すると考えられています。TCP-11は、鞭毛構造の形成や運動性の制御に関わる過程と関連づけられており、受精能獲得（カパシテーション）に伴うシグナル伝達や受精能にも影響を及ぼします。マウスモデルでは、Tcp11の発現や機能の変化が精子品質の低下や生殖能低下（サブファーティリティ）の表現型と関連し、男性生殖障害に対する遺伝的寄与を研究する上で重要です。さらに、その限定的な発現プロファイルは、生殖細胞分化や生殖毒性学研究におけるマーカーとしての利用も支持します。

TCP-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTcp11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tcp11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tcp11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TCP-11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TCP-11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tcp11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TCP-11の機能に不可欠なTcp11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tcp11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TCP-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTCP-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tcp11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TCP-11 HDRプラスミド（m）および TCP-11 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTcp11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTcp11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。