Plásmido Doble Nickase (h) TBC1D23: sc-417378-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TBC1D23 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TBC1D23 (h) y el plásmido de doble nickasa TBC1D23 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TBC1D23. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TBC1D23 | sc-417378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TBC1D23 | sc-417378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBC1D23 codifica una proteína que contiene un dominio TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) y que participa en el tráfico vesicular y la clasificación de carga, con funciones descritas en la coordinación del transporte de endosomas al Golgi mediante interacciones con la maquinaria de anclaje de golginas. Al influir en la dinámica de membranas y la localización de proteínas, TBC1D23 contribuye a la organización intracelular de vías de señalización y secreción relevantes para el desarrollo neuronal y las células polarizadas. La alteración de TBC1D23 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y cambios en la morfología cerebral, lo que respalda su importancia en la formación de circuitos neuronales y la homeostasis celular. Estas características hacen de TBC1D23 un objetivo útil para estudiar la regulación dependiente del tráfico en la distribución de proteínas, procesos sinápticos o axonales y fenotipos celulares relevantes para enfermedades en modelos humanos.
TBC1D23 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TBC1D23 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TBC1D23. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TBC1D23. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TBC1D23 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.