Plásmido Doble Nickase (h) T1R3: sc-401808-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)T1R3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T1R3 (h) y el plásmido de doble nickasa T1R3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TAS1R3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) T1R3 | sc-401808-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) T1R3 | sc-401808-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TAS1R3 codifica el receptor humano del gusto tipo 1 miembro 3 (T1R3), un GPCR de clase C que forma heterodímeros con TAS1R1 o TAS1R2 para constituir receptores de detección de nutrientes responsables de los sabores umami y dulce. Tras la unión del ligando, los receptores que contienen T1R3 se acoplan a proteínas G y activan la señalización PLCβ2–IP3, la movilización de Ca²⁺ intracelular y programas posteriores de MAPK y secreción. Más allá de las papilas gustativas orales, la expresión de TAS1R3 en tejidos gastrointestinales y metabólicos lo vincula con la señalización enteroendocrina y la regulación, sensible a nutrientes, de la liberación hormonal y de la función epitelial. Las vías desreguladas de detección de dulce/umami que involucran a T1R3 se han investigado en contextos como la disfunción metabólica, la inflamación y la alteración de la señalización quimiosensorial en microambientes asociados al cáncer.
T1R3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TAS1R3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TAS1R3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TAS1R3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TAS1R3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.