Plasmide Double Nickase (h) T-type Ca++ CP α1G: sc-418331-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) T-type Ca++ CP α1G correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide T-type Ca++ CP α1G Double Nickase (h) et le plasmide T-type Ca++ CP α1G Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CACNA1G. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) T-type Ca++ CP α1G | sc-418331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) T-type Ca++ CP α1G | sc-418331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1G code pour la sous-unité CaV3.1 (α1G), constitutive du pore des canaux calciques voltage‑dépendants de type T, qui s’activent à de faibles potentiels membranaires et génèrent une entrée transitoire de Ca2+. Ce courant soutient l’activité rythmique, les décharges en salves de rebond et une signalisation dépendante du calcium, reliant l’excitabilité membranaire à des programmes d’expression génique dans les cellules excitables et certaines cellules non excitables. L’activité de CaV3.1 s’inscrit à l’interface de voies régulant l’homéostasie intracellulaire du Ca2+, les oscillations neuronales et le couplage excitation–sécrétion, influençant des processus tels que la progression du cycle cellulaire et la différenciation via des effecteurs sensibles au calcium. Une expression dérégulée de CACNA1G ou une altération de la fonction du canal a été associée à des modifications de l’excitabilité électrique et de la signalisation calcique dans des phénotypes neurologiques et cardiovasculaires, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de biologie des canaux ioniques.
T-type Ca++ CP α1G Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CACNA1G dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CACNA1G. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CACNA1G. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CACNA1G.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.