Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423238

概要

Syngr1は、シナプス前終末に豊富に局在するシナプス小胞膜タンパク質であるシナプトジャイリン1（synaptogyrin-1）をコードし、小胞の組織化と効率的な神経伝達物質放出に寄与します。小胞輸送、ドッキング、エンドサイトーシスなど、シナプス小胞サイクリングの中核過程に関与し、エキソ／エンドサイトーシスのカップリングやシナプス前膜ダイナミクスを制御する経路とも機能的に交差します。マウス神経細胞では、シナプトジャイリン1は興奮性・抑制性シナプスにおけるシナプス伝達および可塑性の研究のためのマーカーおよび機構的ハブとして用いられます。シナプトジャイリン1が関与するシナプス小胞の取り扱い異常やシナプス前タンパク質ネットワークの変化は、シナプス機能障害を特徴とする神経発達疾患や神経変性疾患の病態メカニズム研究において重要です。

Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSyngr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Syngr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Syngr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Synaptogyrin-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Synaptogyrin-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Syngr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Synaptogyrin-1の機能に不可欠なSyngr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Syngr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSynaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Syngr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Synaptogyrin-1 HDRプラスミド（m）および Synaptogyrin-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSyngr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSyngr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。