Svs6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423228

Visão geral

O gene Svs6 do camundongo codifica a proteína secretória 6 das vesículas seminais, uma proteína do trato reprodutor masculino que contribui para a composição e as propriedades biofísicas do fluido seminal. O Svs6 faz parte do programa secretório responsivo a andrógenos no epitélio das vesículas seminais e é comumente usado como marcador de diferenciação das glândulas acessórias e de atividade secretória luminal. Ao influenciar o microambiente do plasma seminal, o Svs6 é relevante para processos que afetam a sobrevivência e a motilidade dos espermatozoides, bem como as interações no trato reprodutor após a ejaculação. A expressão alterada de proteínas secretórias das vesículas seminais é frequentemente investigada em modelos de desregulação endócrina, inflamação e fenótipos reprodutivos, o que sustenta sua utilidade em estudos de vias biológicas relacionados à fertilidade masculina e à biologia das glândulas acessórias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Svs6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Svs6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Svs6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Svs6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Svs6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Svs6 para a investigação da sinalização de Svs6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Svs6 críticos para a função Svs6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Svs6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Svs6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Svs6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Svs6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Svs6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Svs6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Svs6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Svs6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.