Plasmide Double Nickase (h) SUV420H1: sc-404615-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SUV420H1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SUV420H1 Double Nickase (h) et le plasmide SUV420H1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KMT5B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SUV420H1 | sc-404615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SUV420H1 | sc-404615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KMT5B code pour la méthyltransférase humaine des lysines d’histone SUV420H1, une enzyme qui catalyse la di‑ et la triméthylation de H4K20 et contribue à l’établissement d’états de chromatine répressifs. En modulant l’architecture de la chromatine à haut niveau d’organisation et la mémoire épigénétique, SUV420H1 influence le calendrier de réplication de l’ADN, la stabilité du génome et la réparation des dommages à l’ADN, en interaction avec le contrôle du cycle cellulaire et les voies de remodelage de la chromatine. Des profils de méthylation de H4K20 altérés et une activité dérégulée de SUV420H1 ont été associés à des programmes transcriptionnels aberrants et à une instabilité génomique observés dans divers contextes pathologiques, notamment les cancers et les troubles du neurodéveloppement. Ces caractéristiques font de KMT5B une cible utile pour étudier la régulation de l’expression génique dépendante de la chromatine et le maintien de l’intégrité de l’épigénome dans les cellules humaines.
SUV420H1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KMT5B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KMT5B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KMT5B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KMT5B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.