SUV420H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404615-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SUV420H1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SUV420H1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SUV420H1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KMT5B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SUV420H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SUV420H1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KMT5B codifica a metiltransferase humana de lisina em histonas SUV420H1, uma enzima que catalisa a di- e a trimetilação de H4K20 e ajuda a estabelecer estados de cromatina repressivos. Ao moldar a arquitetura da cromatina de ordem superior e a memória epigenética, a SUV420H1 influencia o timing da replicação do DNA, a estabilidade do genoma e o reparo de danos no DNA, interagindo com vias de controlo do ciclo celular e de remodelação da cromatina. Padrões alterados de metilação de H4K20 e a atividade desregulada da SUV420H1 têm sido associados a programas transcricionais aberrantes e à instabilidade genómica observada em múltiplos contextos de doença, incluindo cancro e perturbações do neurodesenvolvimento. Estas propriedades tornam o KMT5B um alvo útil para estudar a regulação da expressão génica dependente de cromatina e a manutenção da integridade do epigenoma em células humanas.
SUV420H1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KMT5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KMT5B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KMT5B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KMT5B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.