STK32A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408625

概要

STK32Aはセリン／スレオニン型プロテインキナーゼをコードし、リン酸化依存的な細胞シグナル伝達の制御に関与すると考えられています。細胞増殖や分化、ならびに細胞骨格関連プロセスの調節において推定される役割を有します。キナーゼファミリーの一員として、STK32Aは転写プログラムやストレス応答性シグナル出力を形作るキナーゼカスケードに影響を及ぼし得る位置づけにあります。キナーゼ活性や発現の変化は、がんをはじめとする複雑疾患において、増殖制御の破綻や状況依存的な経路の再配線と関連することが多く、STK32Aは機序解明研究の対象として重要です。STK32A依存的なリン酸化ネットワークを特徴づけることで、細胞状態や疾患モデルの違いに伴ってシグナル伝達の結合性がどのように変化するかを明らかにできます。

STK32A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTK32A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STK32A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STK32Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、STK32Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、STK32Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STK32A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• STK32Aの機能に不可欠なSTK32Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STK32Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• STK32A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSTK32A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STK32A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  STK32A HDRプラスミド（h）および STK32A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTK32Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTK32A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。