SSTR5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404199

Visão geral

O receptor de somatostatina 5 (SSTR5) é um receptor acoplado à proteína G para a somatostatina que se acopla predominantemente a proteínas Gi/o para suprimir a atividade da adenilil ciclase, reduzir o cAMP intracelular e modular a sinalização de canais iônicos. Por meio de efeitos a jusante em MAPK/ERK e em outras vias reguladas por GPCR, o SSTR5 influencia a secreção hormonal, a neurotransmissão e programas de proliferação de maneira dependente do tipo celular. Em tecidos humanos, o SSTR5 contribui para a regulação endócrina e metabólica, incluindo a modulação da sinalização da insulina e do eixo do hormônio do crescimento. A desregulação da sinalização dos receptores de somatostatina tem sido associada a fenótipos secretórios alterados e a comportamento proliferativo em múltiplos contextos relevantes para doenças, tornando o SSTR5 um nó útil para a investigação de vias de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SSTR5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SSTR5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SSTR5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SSTR5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SSTR5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SSTR5 para a investigação da sinalização de SSTR5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SSTR5 críticos para a função SSTR5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SSTR5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SSTR5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SSTR5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SSTR5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SSTR5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SSTR5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SSTR5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SSTR5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.