SR-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422832-KO-2

Visão geral

Msr1 codifica o receptor “scavenger” de classe A (SR-A), um receptor de reconhecimento de padrões enriquecido em macrófagos que se liga a lipoproteínas modificadas, células apoptóticas e ligantes microbianos para coordenar a captação e a sinalização da imunidade inata. O SR-A promove endocitose e fagocitose mediadas por receptor, moldando o manejo de lipídios, as respostas inflamatórias e a resolução de dano tecidual por meio de crosstalk com vias de receptores do tipo Toll e redes de citocinas. Em modelos murinos, alterações na atividade de Msr1/SR-A têm sido associadas à formação desregulada de células espumosas, inflamação estéril e suscetibilidade a infecções, tornando-o relevante para estudos de processos semelhantes à aterosclerose, neuroinflamação e mecanismos de doenças metabólicas. Sua expressão em linhagens mieloides também dá suporte a pesquisas sobre polarização de macrófagos, processamento de antígenos e vias de depuração em microambientes teciduais complexos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SR-A (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Msr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Msr1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Msr1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SR-A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Msr1 para a investigação da sinalização de SR-A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Msr1 críticos para a função SR-A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Msr1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SR-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SR-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Msr1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SR-A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SR-A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Msr1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Msr1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.