Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423077

Visão geral

Sox1 codifica o fator de transcrição Sox-1, uma proteína de ligação ao DNA do tipo HMG-box que atua precocemente na especificação do neuroectoderma e na manutenção da identidade de progenitores neurais durante o desenvolvimento do camundongo. Sox-1 regula programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular, proliferação e diferenciação no sistema nervoso central, integrando-se a redes transcricionais mais amplas mediadas por SoxB1 e a vias que padronizam o tubo neural. Programas associados a SOX1 desregulados são estudados no contexto de trajetórias neurodesenvolvimentais aberrantes e de infidelidade de linhagem em tumores de origem neural, nos quais mudanças entre estados progenitores e diferenciados podem influenciar fenótipos relevantes para a doença. Como regulador do desenvolvimento, Sox-1 é frequentemente usado como marcador e como nó mecanístico para modelar o comprometimento neural em sistemas de biologia de células-tronco e do desenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sox-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sox1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sox1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sox1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sox-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sox1 para a investigação da sinalização de Sox-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sox1 críticos para a função Sox-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sox1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sox-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sox1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Sox-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sox-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sox1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sox1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.