Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
SNX5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-427326
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SNX5 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SNX5, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SNX5 Antibody (F-11): sc-515215
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SNX5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-427326 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Snx5 codifica la sorting nexin 5 (SNX5), una proteina adattatrice contenente un dominio PX che si lega alle membrane endosomiali arricchite in fosfoinositidi e partecipa allo smistamento endosomiale e alla tubulazione di membrana. SNX5 è coinvolta nel traffico e nel riciclo dei recettori, inclusi processi coordinati con complessi associati a retromer e SNX-BAR, che modellano i carrier endosomiali e regolano il recupero del carico dagli endosomi precoci. Attraverso il controllo del turnover dei recettori e della durata della segnalazione, SNX5 influenza il trasporto vescicolare, la polarizzazione cellulare e l’omeostasi di membrana. Reti di traffico endocitico deregolate che coinvolgono le sorting nexins sono state collegate a neurodegenerazione, rimodellamento della segnalazione associato al cancro e disfunzioni immunitarie, rendendo Snx5 un nodo utile per ricerche mirate alle vie di segnalazione in modelli murini.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SNX5 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Snx5 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Snx5 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Snx5 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SNX5.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Snx5 per lo studio della segnalazione di SNX5, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Snx5 critici per la funzione di SNX5
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Snx5 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SNX5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SNX5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Snx5. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SNX5 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SNX5 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Snx5 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Snx5 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.