Plásmido Doble Nickase (h) SLK: sc-406490-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLK (h) y el plásmido de doble nickasa SLK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLK. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SLK Anticuerpo (G-9): sc-515493
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLK | sc-406490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLK | sc-406490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SLK (quinasa serina/treonina tipo STE20) humana es una quinasa citoplasmática implicada en la remodelación del citoesqueleto, la polaridad celular y la regulación de la dinámica asociada a microtúbulos y actina. Participa en redes de señalización que coordinan la migración celular, la adhesión y las vías de respuesta al estrés, y se ha vinculado con la modulación de programas apoptóticos y proliferativos de manera dependiente del contexto. La actividad de SLK se intersecta con cascadas de quinasas que influyen en la progresión mitótica y la morfogénesis tisular, lo que la hace relevante para estudios sobre la integridad epitelial y fenotipos invasivos. La desregulación de la expresión o la señalización de SLK se ha asociado en la literatura con procesos oncogénicos, rasgos relacionados con la metástasis y alteraciones en la biología neuronal y del desarrollo, lo que respalda su utilidad como diana para investigaciones mecanísticas.
SLK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLK en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLK. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLK. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLK alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.