Plasmide Double Nickase (h) SLK: sc-406490-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLK correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLK Double Nickase (h) et le plasmide SLK Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLK. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SLK Antibody (G-9): sc-515493
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLK | sc-406490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLK | sc-406490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SLK humaine (STE20-like serine/threonine kinase) est une kinase cytoplasmique impliquée dans le remodelage du cytosquelette, la polarité cellulaire et la régulation de la dynamique associée aux microtubules et à l’actine. Elle participe à des réseaux de signalisation qui coordonnent la migration cellulaire, l’adhérence et les voies de réponse au stress, et a été associée, de manière dépendante du contexte, à la modulation des programmes apoptotiques et prolifératifs. L’activité de SLK s’articule avec des cascades de kinases qui influencent la progression mitotique et la morphogenèse tissulaire, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’intégrité épithéliale et des phénotypes invasifs. Une dérégulation de l’expression ou de la signalisation de SLK a été associée dans la littérature à des processus oncogéniques, à des traits liés aux métastases, ainsi qu’à des altérations de la biologie neuronale et du développement, ce qui en fait une cible utile pour des investigations mécanistiques.
SLK Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLK dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLK. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLK. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLK.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.