SLITRK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414460

概要

SLITRK4は、神経突起の伸長、シナプスの発達、神経回路形成を形作る細胞間接着プロセスに関与するとされるSLITRKファミリーの神経細胞膜貫通タンパク質をコードします。細胞外のロイシンリッチリピート（LRR）モチーフと細胞内のシグナル伝達インターフェースを介して、SLITRK4はシナプス形成、軸索／樹状突起のパターニング、神経細胞間結合の調節を司る経路と関連付けられています。神経系における発現パターンや、SLITRKタンパク質間の機能的相同性は、神経発達および神経精神疾患に関連する生物学的過程における役割を支持します。SLITRKファミリーの活性変化は回路レベルの機能不全との関連で研究されており、SLITRK4は神経モデルにおける機序解明研究の有用な標的となります。

SLITRK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLITRK4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLITRK4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLITRK4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLITRK4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLITRK4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLITRK4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLITRK4の機能に不可欠なSLITRK4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLITRK4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLITRK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLITRK4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLITRK4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLITRK4 HDRプラスミド（h）および SLITRK4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLITRK4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLITRK4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。