Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
SLC6A14 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-408198
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SLC6A14 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SLC6A14基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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SLC6A14 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-408198 | 20 µg | $397.00 |
概述
SLC6A14（亦称 ATB0,+）编码一种钠/氯依赖性的质膜转运体，可介导中性与阳离子氨基酸的浓缩摄取，并对包括必需氨基酸在内的广谱底物具有显著转运能力。通过调控细胞内氨基酸的可用性，SLC6A14 影响营养感知与代谢信号通路（如 mTORC1），从而塑造细胞生长、氧化还原平衡及应激适应。其表达与上皮转运生理相关，并在疾病情境中与氨基酸通量改变有关，此时营养获取与代谢过程往往发生重编程。作为位于细胞表面的溶质载体，SLC6A14 是一个便于研究的关键节点，可用于解析氨基酸转运对增殖、分化以及免疫-代谢相互作用的贡献。
SLC6A14 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SLC6A14基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SLC6A14基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SLC6A14开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SLC6A14蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SLC6A14缺失的细胞模型，用于SLC6A14信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SLC6A14 功能至关重要的 SLC6A14 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SLC6A14 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SLC6A14 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SLC6A14 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SLC6A14 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SLC6A14 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 SLC6A14 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SLC6A14同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SLC6A14靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。