Plasmide Double Nickase (m) SLC38A10: sc-428214-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SLC38A10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC38A10 Double Nickase (m) et le plasmide SLC38A10 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Slc38a10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SLC38A10 | sc-428214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) SLC38A10 | sc-428214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc38a10 code pour SLC38A10, un transporteur d’acides aminés neutres couplé au sodium, qui contribue à l’absorption cellulaire des acides aminés et au maintien de leur homéostasie dans les tissus de souris. En régulant les pools intracellulaires de substrats clés pour la synthèse protéique et le métabolisme « une‑carbone », SLC38A10 peut influencer des voies de détection des nutriments telles que la signalisation mTORC1, l’équilibre rédox et les réponses au stress du réticulum endoplasmique (RE). Des altérations du transport des acides aminés ont été associées à des phénotypes métaboliques et neurobiologiques, ce qui fait de Slc38a10 une cible pertinente pour étudier comment l’activité des transporteurs façonne la croissance cellulaire, l’adaptation au stress et la fonction neuronale. L’étude fonctionnelle de SLC38A10 soutient des travaux mécanistiques dans des modèles de stress nutritionnel, de dialogue mitochondrie/RE et de réseaux de signalisation dépendants des acides aminés.
SLC38A10 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Slc38a10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Slc38a10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Slc38a10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Slc38a10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.