SETX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402354
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SETX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SETX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SETX Anticorpo (QQ-7): sc-100319
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SETX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402354 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SETX (senataxina) codifica uma helicase de DNA/RNA que resolve R-loops e outras estruturas secundárias de ácidos nucleicos geradas durante a transcrição, coordenando assim o alongamento transcricional com a manutenção do genoma. Atua na interface entre a resposta a danos no DNA acoplada à transcrição, o controlo do stress replicativo e o processamento de RNA, ajudando a limitar quebras de dupla cadeia e recombinação aberrante em loci transcritos ativamente. A atividade de SETX está ligada a vias que envolvem a RNA polimerase II, fatores de reparo do DNA e a vigilância de complexos de transcrição estagnados. A desregulação ou mutação de SETX associa-se a fenótipos neurodegenerativos e síndromes de instabilidade genómica, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos de danos no DNA associados à transcrição e vulnerabilidade neuronal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SETX (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SETX em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SETX, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SETX na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SETX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SETX para a investigação da sinalização de SETX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SETX críticos para a função SETX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SETX para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SETX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SETX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SETX. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SETX Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SETX (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SETX para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SETX definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.