SENP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403747

概要

SENP3は、標的タンパク質からSUMO2/3を優先的に脱結合するSUMO特異的プロテアーゼをコードしており、可逆的なSUMO化の動態を調節しています。SENP3は主に核小体に局在し、リボソーム生合成、核小体の恒常性維持、ならびに細胞ストレス応答に関連する転写プログラムの制御に関与します。SUMO依存的なタンパク質間相互作用を調節することで、SENP3はDNA損傷シグナル伝達、細胞周期制御、クロマチン関連の制御などの過程に影響を与えます。SENP3活性の異常やSUMO経路の不均衡は、増殖シグナルの変調やゲノム維持機構の破綻と関連しており、がん生物学やその他のストレス関連疾患の病態に関与することが示唆されています。

SENP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSENP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SENP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SENP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SENP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SENP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SENP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SENP3の機能に不可欠なSENP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SENP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SENP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSENP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SENP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SENP3 HDRプラスミド（h）および SENP3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSENP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSENP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。