Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407114

概要

SELENOVは、セレンを含むタンパク質であるセレノプロテインVをコードしており、セレノシステインを取り込むことで細胞内のレドックス恒常性に関与します。他のセレノプロテインと同様に、酸化ストレスの制御や、タンパク質の折りたたみ、シグナル伝達の忠実性、活性酸素種（ROS）からの防御に影響するチオール依存的なレドックス過程と関連しています。セレノプロテインの生物学的特性やセレン利用の変化は、炎症や代謝調節に関わる経路に影響を及ぼし得るため、SELENOVはストレス適応応答の機構研究において重要な対象となります。その発現プロファイルと予測されるレドックス活性は、酸化還元バランスおよびセレン依存性タンパク質ネットワークが疾患関連の細胞表現型に寄与する状況での検討を支持します。

Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSELENOV遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SELENOV内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SELENOVのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Selenoprotein Vタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Selenoprotein Vシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SELENOV欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Selenoprotein Vの機能に不可欠なSELENOVエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SELENOVゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSelenoprotein V CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SELENOV遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Selenoprotein V HDRプラスミド（h）および Selenoprotein V HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSELENOVホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSELENOV標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。