Selenoprotein K Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407002

Descripción general

SELENOK codifica la selenoproteína K, una pequeña proteína de membrana del retículo endoplásmico que incorpora selenocisteína y contribuye a mantener la homeostasis redox en células inmunitarias y secretoras. La selenoproteína K participa en el control de calidad asociado al RE y se relaciona con el flujo de calcio y la palmitoilación de proteínas mediante su interacción con el complejo palmitoiltransferasa DHHC6, lo que influye en la señalización de receptores y la organización de la membrana. Contribuye a una activación eficiente de las células inmunitarias, a las respuestas al estrés oxidativo y a la proteostasis bajo estrés inflamatorio o metabólico. La alteración de la actividad de SELENOK se ha asociado con una señalización inflamatoria desregulada y con fenotipos relevantes para la biología de enfermedades inmunomediadas y neurodegenerativas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein K (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SELENOK en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SELENOK junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SELENOK tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Selenoprotein K.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SELENOK para la investigación de la señalización de Selenoprotein K, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SELENOK críticos para la función de Selenoprotein K
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SELENOK para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Selenoprotein K CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Selenoprotein K CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SELENOK. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Selenoprotein K (h) y el plásmido HDR Selenoprotein K (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SELENOK para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SELENOK definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.