SCP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422828

Visão geral

O gene **Scp2** do rato codifica a proteína carreadora de esteróis 2 (SCP2), uma pequena proteína de transferência de lipídios que se liga ao colesterol, a intermediários de ácidos biliares e a acil-CoAs de ácidos graxos de cadeia longa, e os transporta dentro das células, com papéis destacados no manejo de lipídios em peroxissomos e no citosol. A SCP2 sustenta o tráfego intracelular de lipídios e contribui para a β-oxidação peroxissomal, o metabolismo de lipídios éter e a homeostase de esteróis, conectando-se a redes metabólicas lipídicas mais amplas que influenciam a composição de membranas e respostas ao estresse oxidativo. Alterações na função da SCP2 têm sido associadas a perturbações no uso de colesterol e ácidos graxos e são frequentemente estudadas no contexto de desregulação metabólica e fenótipos de estresse celular induzidos por lipídios. Assim, **Scp2** é relevante para pesquisas mecanísticas sobre biologia de peroxissomos, transporte de lipídios e remodelamento de vias metabólicas em tipos celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SCP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Scp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Scp2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Scp2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SCP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Scp2 para a investigação da sinalização de SCP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Scp2 críticos para a função SCP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Scp2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SCP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SCP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Scp2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SCP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SCP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Scp2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Scp2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.