SAPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406315

概要

PPP6R1は、プロテインホスファターゼ6（PP6）の調節サブユニットであるSAPS1をコードしており、触媒活性を特定の基質や細胞内区画へと導く役割を担います。PP6複合体の組み立てを介して、SAPS1は細胞周期の進行、有糸分裂紡錘体の構築、DNA損傷応答シグナル伝達に影響するセリン／スレオニン脱リン酸化プログラムに寄与します。PP6に関連するリン酸化制御は、ストレス応答性経路やチェックポイント制御と交差し、ゲノム安定性と増殖能を形作ります。PP6の調節サブユニットの機能異常は、がんに伴うシグナル伝達の再配線を含む複数の疾患状況で観察されるリン酸化恒常性の破綻に関与することが示唆されています。

SAPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPPP6R1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PPP6R1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PPP6R1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SAPS1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SAPS1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PPP6R1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SAPS1の機能に不可欠なPPP6R1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PPP6R1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SAPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSAPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PPP6R1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SAPS1 HDRプラスミド（h）および SAPS1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPPP6R1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPPP6R1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。