SAP 49 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407057-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAP 49O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SAP 49 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SAP 49 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SF3B4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SAP 49 Anticorpo (G-12): sc-365570
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAP 49 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407057-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAP 49 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407057-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SF3B4 codifica a SAP 49, um componente central do subcomplexo SF3b dentro da pequena ribonucleoproteína nuclear U2, que ajuda a reconhecer sequências do ponto de ramificação durante o splicing do pré-mRNA. Ao sustentar a montagem do spliceossoma e a seleção de sítios de splicing, a SAP 49 contribui para a integridade do transcriptoma e para a regulação subsequente do processamento de RNA, de programas do ciclo celular e de respostas ao estresse. A perturbação do splicing dependente de SF3B4 está associada à expressão alterada de isoformas e a mudanças amplas em redes de regulação gênica observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo cânceres e distúrbios do desenvolvimento. Como fator do spliceossoma, a SAP 49 é frequentemente estudada em mecanismos de fidelidade do splicing, controle do splicing alternativo e relações entre genótipo e isoformas.
SAP 49 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SF3B4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SF3B4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SF3B4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SF3B4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.