Plásmido Doble Nickase (m) RNF123: sc-429979-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RNF123 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RNF123 (m) y el plásmido de doble nickasa RNF123 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rnf123. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RNF123 | sc-429979-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) RNF123 | sc-429979-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rnf123 codifica la ligasa E3 de ubiquitina RNF123 (también conocida como KPC1), una proteína con dominio RING finger que contribuye a la proteostasis dependiente de ubiquitina al catalizar la ubiquitinación de sustratos y dirigir proteínas hacia el proteasoma 26S. RNF123 se ha relacionado con la regulación de la progresión del ciclo celular, incluido el recambio de reguladores del ciclo celular como CDKN1B/p27, y puede influir en puntos de control, proliferación y respuestas al estrés celular a través de las vías ubiquitina–proteasoma. En sistemas murinos, la perturbación de la función de RNF123 es, por tanto, relevante para desentrañar redes de señalización por ubiquitina que se intersectan con el control del crecimiento, la diferenciación y la homeostasis tisular. La ubiquitinación alterada y la degradación mediada por el proteasoma están ampliamente implicadas en la investigación oncológica y neurobiológica, lo que convierte a RNF123 en un nodo útil para estudios mecanísticos de la proteostasis y los desequilibrios de señalización asociados a enfermedades.
RNF123 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rnf123 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rnf123. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rnf123. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rnf123 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.