Plasmide Double Nickase (h) RNase 7: sc-416419-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RNase 7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RNase 7 Double Nickase (h) et le plasmide RNase 7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RNASE7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RNase 7 | sc-416419-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RNase 7 | sc-416419-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNASE7 code l’ARNase 7, une ribonucléase cationique sécrétée de la superfamille RNase A, qui contribue à la défense innée épithéliale au niveau de la peau et des surfaces muqueuses. Au-delà de la dégradation de l’ARN, l’ARNase 7 participe à la fonction de barrière antimicrobienne et est régulée par des signaux inflammatoires ainsi que par des programmes de différenciation épithéliale, la reliant aux interactions hôte–microbe. Son expression est marquée dans les kératinocytes et est modulée par des voies de signalisation induites par les cytokines et par des voies dépendantes des récepteurs de reconnaissance des motifs, qui façonnent l’immunité muqueuse. Une expression altérée de RNASE7 a été rapportée dans des affections cutanées inflammatoires et dans des contextes liés aux infections, ce qui en fait un marqueur utile et un nœud mécanistique pour l’étude des réponses immunitaires épithéliales.
RNase 7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RNASE7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RNASE7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RNASE7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RNASE7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.