Plasmide Double Nickase (m) RIOK2: sc-426346-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) RIOK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RIOK2 Double Nickase (m) et le plasmide RIOK2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Riok2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) RIOK2 | sc-426346-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) RIOK2 | sc-426346-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Riok2 code pour RIOK2, une kinase sérine/thréonine atypique qui agit comme un facteur d’assemblage essentiel lors des étapes tardives de la maturation cytoplasmique de la sous-unité ribosomique 40S. RIOK2 participe à la biogenèse des ribosomes en coordonnant la maturation du pré‑ARNr et le contrôle qualité avec la libération et le recyclage des facteurs du pré‑40S, reliant ainsi la capacité de traduction aux programmes de croissance et de prolifération cellulaires. Comme la production de ribosomes est étroitement intégrée à la régulation du cycle cellulaire et aux réponses au stress cellulaire, une perturbation de RIOK2 peut modifier la protéostasie et la production traductionnelle globale. La dérégulation des voies de biogenèse ribosomique est largement impliquée dans des anomalies du développement et dans la biologie des maladies prolifératives, ce qui fait de RIOK2 un nœud utile pour des études mécanistiques du contrôle de la croissance.
RIOK2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Riok2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Riok2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Riok2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Riok2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.