Particules Lentivirales d'Activation (h) Ribosomal Protein L22L1: sc-402323-LAC

RPL22L1 code pour la protéine ribosomique L22L1, un composant ribosomique cytoplasmique qui soutient la fonction de la grande sous-unité 60S et contribue à une traduction efficace des ARNm. En tant qu’élément des processus centraux de biogenèse des ribosomes et de contrôle traductionnel, RPL22L1 influence la protéostasie et les programmes de croissance cellulaire, sensibles aux variations de la composition ribosomique. Des perturbations du dosage des protéines ribosomiques peuvent affecter la régulation du cycle cellulaire, les réponses au stress et l’expression génique spécifique de lignée via une traduction altérée d’ARNm structurés ou régulateurs. En recherche biomédicale, RPL22L1 est étudié dans le contexte de la spécialisation des ribosomes et des voies de synthèse protéique dérégulées, fréquemment impliquées dans des phénotypes oncogéniques et développementaux.

Les particules d'activation lentivirales Ribosomal Protein L22L1 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de RPL22L1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Ribosomal Protein L22L1 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription RPL22L1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Ribosomal Protein L22L1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif RPL22L1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.