RGC32 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404843

概要

RGCCは、補体系の活性化や多様なストレスシグナルによって誘導される細胞周期関連タンパク質RGC32（response gene to complement 32）をコードします。RGC32は、サイクリン依存性シグナルを調節し、チェックポイント制御に関与するキナーゼ経路と相互作用することで、G2/M期の進行と増殖の制御に関与します。また、内皮細胞および平滑筋細胞の活性化、遊走、細胞外マトリックスのリモデリングへの影響を介して、炎症および血管生物学とも関連付けられています。RGC32発現の異常は、腫瘍関連の増殖や線維化に伴う組織リモデリングなど、複数の病態コンテキストで報告されており、増殖制御や微小環境応答を研究するための機序的な要所（ノード）としての有用性が示唆されています。

RGC32 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRGCC遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RGCC内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RGCCのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RGC32タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RGC32シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RGCC欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RGC32の機能に不可欠なRGCCエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RGCCゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RGC32 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRGC32 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RGCC遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RGC32 HDRプラスミド（h）および RGC32 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRGCCホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRGCC標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。