REPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422650

Visão geral

Reps1 (REPS1) codifica um adaptador endocítico envolvido na internalização de receptores e no tráfego de membranas por meio de interações com proteínas associadas à endocitose mediada por clatrina e à sinalização de pequenas GTPases. REPS1 participa do controle espacial da sinalização ao regular a reciclagem e a diminuição (downregulation) de receptores ativados na superfície celular, influenciando vias que modulam proliferação, adesão e a dinâmica do citoesqueleto. Em sistemas murinos, a perturbação de Reps1 é usada para investigar como o tráfego endocítico se integra a redes de sinalização dependentes de fatores de crescimento e integrinas em contextos imunes e epiteliais. A desregulação do tráfego de receptores e da atenuação de sinais é amplamente relevante para mecanismos associados a doenças, incluindo migração celular alterada e transdução de sinal aberrante, tornando Reps1 um nó útil para estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO REPS1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Reps1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Reps1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Reps1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína REPS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Reps1 para a investigação da sinalização de REPS1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Reps1 críticos para a função REPS1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Reps1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo REPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo REPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Reps1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo REPS1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR REPS1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Reps1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Reps1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.