Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RelB Double Nickase Plasmid (h): sc-400371-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das RelB Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- RelB Double-Nickase-Plasmid (h) und RelB Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf RELB abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: RelB: sc-48366
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
RelB Double Nickase Plasmid (h) | sc-400371-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RelB Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400371-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RELB kodiert RelB, einen Transkriptionsfaktor der NF-κB-Familie, der überwiegend im nicht-kanonischen NF-κB-Signalweg wirkt, vor allem durch Heterodimerisierung mit p52 (NFKB2). RelB reguliert Genprogramme, die an der Reifung dendritischer Zellen, der Organogenese lymphatischer Organe, dem Überleben von B-Zellen und entzündlicher Signalübertragung beteiligt sind, und integriert Signale von Rezeptoren wie CD40, BAFFR und LTβR. Durch die Steuerung der Zytokin- und Chemokinexpression sowie von Antigenpräsentationswegen beeinflusst RelB angeborene und adaptive Immunantworten. Eine Fehlregulation der RELB-Aktivität wird mit Immundysfunktionen und entzündlichen Phänotypen in Verbindung gebracht; zudem wird ein verändertes Gleichgewicht der NF-κB-Signalwege häufig im Kontext von Signalen im Tumormikromilieu und der Biologie hämatologischer Malignome untersucht.
RelB Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des RELB-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von RELB abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die RELB-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit RELB-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.