RBMY1J CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405629

概要

RBMY1Jは、RNA認識モチーフを有し転写後制御に関与するRBMYファミリーに関連した、Y染色体連鎖のRNA結合タンパク質をコードしています。RBMYタンパク質は主に男性の生殖系列で発現し、発生過程の生殖細胞におけるpre-mRNAスプライシング、mRNA安定性、さらに翻訳制御の可能性を介して精子形成に関与すると考えられています。これらの機能は、スプライソソーム関連のRNAプロセシング経路や、減数分裂の進行および生殖細胞分化に必要なより広範な遺伝子発現プログラムと交差します。RBMY座位の完全性や発現の変化は、Y染色体異常や男性不妊の表現型と関連づけられており、RBMY1Jは生殖系列の遺伝子制御および生殖生物学の研究において重要な対象となります。

RBMY1J CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRBMY1J遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RBMY1J内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RBMY1Jのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RBMY1Jタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RBMY1Jシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RBMY1J欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RBMY1Jの機能に不可欠なRBMY1Jエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RBMY1Jゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RBMY1J CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRBMY1J CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RBMY1J遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RBMY1J HDRプラスミド（h）および RBMY1J HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRBMY1Jホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRBMY1J標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。