RBM15 Double Nickase Plasmid (h): sc-417289-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das RBM15 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- RBM15 Double-Nickase-Plasmid (h) und RBM15 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf RBM15 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
RBM15 Double Nickase Plasmid (h) | sc-417289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM15 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-417289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM15 (RNA-Bindungsmotiv-Protein 15) ist ein nukleärer RNA-bindender Faktor, der die posttranskriptionelle Genexpression durch die Kontrolle des alternativen Spleißens, der RNA-Stabilität und des mRNA-Exports reguliert. Es wirkt in Ribonukleoprotein-Komplexen und wird mit epigenetischen sowie RNA-modifikationsassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht, einschließlich der Modulation des m6A-abhängigen RNA-Stoffwechsels über Interaktionen mit zentralen Komponenten des Writer-Komplexes. RBM15 trägt zur Linienfestlegung und zu hämatopoetischen Programmen bei, und eine Fehlregulation der RBM15-assoziierten RNA-Prozessierung wurde in onkogene transkriptionelle Netzwerke eingebunden, darunter chromosomale Umlagerungen mit RBM15-Beteiligung bei akuten Leukämien. Diese Funktionen machen RBM15 zu einem nützlichen Ziel, um die Kopplung zwischen RNA-Prozessierung und Zellzustandsübergängen in menschlichen Modellsystemen zu untersuchen.
RBM15 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des RBM15-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von RBM15 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die RBM15-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit RBM15-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.