RBM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418527-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RBM10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RBM10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RBM10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RBM10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RBM10 Anticorpo (H-4): sc-515548
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418527-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418527-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM10 (proteína 10 com motivo de ligação a RNA) é um fator de ligação a RNA predominantemente nuclear que regula o splicing de pré‑mRNA, a seleção alternativa de éxons e o processamento de RNA por meio de interações com componentes do spliceossomo e motivos de RNA específicos de sequência. Ao moldar o repertório de isoformas de transcritos, o RBM10 influencia programas de expressão gênica ligados ao controle do ciclo celular, à apoptose e à diferenciação, e tem sido implicado em redes relevantes de sinalização, como decisões de splicing associadas à via Notch. A atividade ou expressão desregulada de RBM10 está associada a paisagens de splicing alteradas observadas em múltiplos contextos de câncer, nas quais a troca de isoformas pode afetar vias de proliferação e de resposta ao estresse. Essas propriedades tornam o RBM10 um alvo útil para estudos mecanísticos da regulação de splicing e da remodelação do transcriptoma em células humanas.
RBM10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RBM10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RBM10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RBM10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RBM10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.