Date published: 2026-7-11

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RBCK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402044-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • RBCK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase RBCK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RBCK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RBCK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RBCK1 Anticorpo (E-2): sc-365523
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    RBCK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-402044-NIC
    20 µg
    $410.00

    RBCK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-402044-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    RBCK1 (também conhecido como HOIL-1) codifica uma ligase de ubiquitina E3 que atua como componente central do complexo de montagem de cadeias lineares de ubiquitina (LUBAC), coordenando eventos de ubiquitinação ligados a Met1 que moldam a sinalização imune inata e adaptativa. Por meio da regulação da ativação de NF-κB e das respostas de vias inflamatórias a jusante de receptores como o TNFR e de certos receptores de reconhecimento de padrões, RBCK1 influencia a produção de citocinas, a sobrevivência celular e respostas ao estresse. RBCK1 também participa da proteostase e de vias de controle de qualidade por meio de redes de sinalização por ubiquitina. A desregulação da atividade de RBCK1/LUBAC tem sido associada a fenótipos imunes e autoinflamatórios e foi estudada em contextos que incluem imunodeficiência e inflamação tecidual.

    RBCK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RBCK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RBCK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RBCK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RBCK1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.