RARα/Retinoic Acid Receptor α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400529-NIC

O RARA codifica o RARα, um receptor nuclear ativado por ligante que forma heterodímeros com o RXR para se ligar a elementos de resposta ao ácido retinoico e regular programas de transcrição que controlam decisões de destino celular. Por meio da sinalização por retinoides, o RARα coordena processos como desenvolvimento embrionário, diferenciação epitelial, controle do ciclo celular e remodelamento de cromatina, de maneira dependente do contexto. A atividade do RARα é moldada pela disponibilidade do ligante e pela troca de correaguladores, conectando-o a vias que governam repressão/ativação transcricional e comprometimento de linhagem. A desregulação da transcrição dependente de RARA e da sinalização do receptor tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a programas transcricionais oncogênicos em contextos hematopoéticos e de tecidos sólidos, sustentando sua relevância em estudos de mecanismos de doença.

RARα/Retinoic Acid Receptor α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RARA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RARA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RARA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RARA interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.