PTTG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418367

Visão geral

PTTG2 (gene 2 transformador de tumores hipofisários, *pituitary tumor-transforming gene 2*) codifica uma proteína do tipo securina, implicada na regulação da separação das cromátides-irmãs e na progressão do ciclo celular, com ligações ao controlo do checkpoint mitótico e à manutenção da estabilidade genómica. Como parte de vias que coordenam o início da anáfase e a atividade de proteases envolvidas na segregação cromossómica, alterações na expressão de PTTG2 podem influenciar a proliferação, a aneuploidia e as respostas celulares ao stress. A desregulação de membros da família PTTG foi reportada em vários tipos de tumores, sustentando a investigação de PTTG2 em contextos de sinalização oncogénica e fenótipos conduzidos pelo ciclo celular. Assim, o PTTG2 humano é relevante para estudos mecanísticos de mitose, danos associados à replicação e programas de transcrição acoplados ao estado proliferativo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PTTG2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PTTG2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PTTG2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PTTG2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PTTG2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PTTG2 para a investigação da sinalização de PTTG2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PTTG2 críticos para a função PTTG2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PTTG2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PTTG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PTTG2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PTTG2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PTTG2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PTTG2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PTTG2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PTTG2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.