Plásmido Doble Nickase (m) PTP1B: sc-422502-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PTP1B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PTP1B (m) y el plásmido de doble nickasa PTP1B (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ptpn1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PTP1B | sc-422502-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino *Ptpn1* codifica la proteína tirosina fosfatasa 1B (PTP1B), una fosfatasa asociada al retículo endoplásmico (RE) que desfosforila receptores tirosina quinasa e intermediarios clave de señalización para limitar las respuestas a factores de crecimiento y citocinas. PTP1B es un regulador negativo central de la señalización del receptor de insulina y del receptor de leptina, modulando la dinámica de las vías PI3K–AKT y MAPK y la expresión génica metabólica aguas abajo. Mediante la modulación de JAK/STAT y de los estados de fosforilación de los receptores, PTP1B influye en la señalización inflamatoria, la adhesión celular y las respuestas al estrés. La actividad desregulada de *Ptpn1*/PTP1B se estudia ampliamente en el contexto de la resistencia a la insulina, la disfunción metabólica asociada a la obesidad y la reprogramación de la señalización relevante en cáncer, lo que respalda su uso en la disección de vías y en estudios genotipo–fenotipo en modelos murinos.
PTP1B El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ptpn1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ptpn1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ptpn1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ptpn1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.