PSM Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401947-LAC

FOLH1 codifica o antígeno de membrana específico da próstata (PSM), uma metaloproteptidase transmembranar de zinco do tipo II com atividades de folato-hidrolase e NAALADase, que regulam o processamento extracelular de folatos e a sinalização glutamatérgica. A proteína influencia a captação de nutrientes e o metabolismo de neurotransmissores por meio da clivagem de folatos poli-γ-glutamados e de N-acetilaspartilglutamato, relacionando-se assim com a disponibilidade de aminoácidos e a homeostase sináptica. A expressão de FOLH1 é fortemente enriquecida no epitélio prostático e é amplamente utilizada como marcador molecular em estudos de biologia da próstata, enquanto sua atividade enzimática em tecidos neurais sustenta investigações sobre neurotransmissão excitatória e processos neuroinflamatórios. A desregulação da expressão e da atividade de FOLH1/PSM tem sido associada à biologia do câncer de próstata e a vias relevantes para a neurodegeneração e para a remodelação do microambiente associado a tumores.

As Partículas de Ativação Lentivirais PSM (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de FOLH1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais PSM (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição FOLH1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de PSM. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo FOLH1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.