Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PrP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401061-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PrPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PrP (h) e o Plasmídeo Double Nickase PrP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRNP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PrP Anticorpo (G-12): sc-398451
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PrP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401061-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PrP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401061-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O PRNP humano codifica a proteína priônica PrP, uma proteína de superfície celular ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI), enriquecida no sistema nervoso e implicada na função sináptica, na ligação ao cobre e nas respostas celulares ao estresse. A PrP passa por tráfego endocítico e processamento constitutivos por vias secretoras e endolisossomais, intersectando-se com redes de proteostase, incluindo o sistema ubiquitina–proteassoma e a autofagia. O mau dobramento e a conversão conformacional da PrP são centrais para a biologia dos príons e estão associados a fenótipos neurodegenerativos caracterizados por agregação proteica e disfunção neuronal. Por isso, o PRNP é amplamente estudado em modelos de mau dobramento proteico, sinalização em microdomínios de membrana e fatores do hospedeiro que influenciam a suscetibilidade à propagação do tipo priônica.
PrP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRNP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRNP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRNP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRNP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.