Plasmide Double Nickase (h) PLIC-1: sc-408872-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PLIC-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PLIC-1 Double Nickase (h) et le plasmide PLIC-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UBQLN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PLIC-1 | sc-408872-NIC | 20 µg | $410.00 |
UBQLN1 code l’ubiquiline‑1 (PLIC‑1), un adaptateur de type ubiquitine‑like/ubiquitin‑associated (UBL/UBA) qui couple des substrats polyubiquitinylés au protéasome 26S et contribue au contrôle qualité des protéines. PLIC‑1 participe au maintien de l’homéostasie du système ubiquitine–protéasome, à la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD) et au renouvellement de protéines mal repliées ou sujettes à l’agrégation, en interaction avec des voies liées à l’autophagie qui maintiennent la protéostasie. Une dysrégulation de la fonction d’UBQLN1/PLIC‑1 a été associée à des réponses au stress cellulaire et à des phénotypes d’agrégation protéique pertinents pour des modèles de maladies neurodégénératives et d’autres troubles caractérisés par une altération du maintien du protéome. Comme UBQLN1 influence la dégradation, la signalisation et l’adaptation au stress, il est largement étudié pour son impact sur les voies dépendantes de l’ubiquitine et les réseaux de protéostasie dans les cellules humaines.
PLIC-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UBQLN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UBQLN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UBQLN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UBQLN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.